紫外光分光光度计如何使用?

使用方法:开机步骤
1  开光谱仪电源
2  开计算机电源
3  在文件管理器中用鼠标指按UV  WinLab图标，此时出现UV  WinLab的应用窗口，仪器已准备好，可选用适当方法进行分析操作。
2  方法:在分析中必须对分光光度计设定一些必要的参数，这些参数的组合就形成一个“方法”。Lambda系列UV  WinLab软件预设四类常用方法。
1)扫描(SCAN),用以进行光谱扫描。
2)时间驱动(TIME  DRIVER),用以观察一定时间内某种特定波长处纵坐标值的变化，如酶动力学。
3)波长编程(WP)用以在多个波长下测定样品在一定时间内的纵坐标值变化，并可以计算这些纵坐标值的差或比值。
4)浓度(CONC)用以建立标准曲线并测定浓度。
2.1  进入所需方法，在方法窗口中选择所需方法的文件名。
2.2  方法的设定
2.2.1  扫描、波长编程及时间驱动
各项方法可根据显示的参数表，逐项按需要选用或填入，并可参考提示。
2.2.2  浓度
浓度方法窗口下方标签较多，说明做浓度测定时需要参数较多。用鼠标指按每一标签，可翻出下页，其上有一些需要测定的参数。必须逐页设定。
3  工具条
3.1  SETUP
当所需的各项参数都已在参数中设好后，必须用鼠标指按SETUP，才能将仪器调整到所设状态。
3.2  AUTOZERO
用鼠标指按此键，分光光度计即进行调零(在光谱扫描中则进行基线校正)。
3.3  START
用鼠标指按此键，光度计即开始运行所设定的方法。
4  方法运行
4.1  扫描，时间驱动，波长编程
方法选好后，先放入参比溶液，按AUTOZERO键，进行自自动校零或背景校正结束后再放入样品，按START，分光光度计即开始进行，同时屏幕上出现图形窗口，将结果显示出来。
4.2  浓度
4.2.1制订标准曲线
1  方法选好后，确认各项数据正确，特别是REFS页中第一行要选中右上角的“edit  mode”。再放入参比溶液，按AUTOZERO键自动校零或背景校正。
2  按setup,待该图标消失后，再按“start”,按提示依次放入标准色列的各管溶液，每次都按提示进行操作。
3  标准色列测定
完毕后，屏幕上出现calibgraphwindow,显示拟合的标准线，并标出各项标准管的位置，屏幕下方还有一条Concentration  mode的对话框，可以用来修改拟合的曲线类型(按  change  calbration),或修改标准溶液的任何一管(replace),或取消某一管(delete),或增加标准溶液管数(add)。如过已经满意，则按analyse  sample键，进入样品测定窗口。
4  标准曲线有关的各项数据，均在calibresultwindow中，可用鼠标将其调出观察。其中包括每个标准溶液的具体数据，标准曲线的回程方程式，相关系数，残差。
4.2.2样品浓度测定
4.2.2.1刚制定好的标准曲线接着进行样品浓度测定时
1  只需在concentration  mode对话框按analyse  sample键，进入样品测定窗口。
2  按设定的样品顺序放入各样品管，每次按提示进行操作。
3  屏幕上出现结果窗口，结果数据将依次显示在样品表中的相应位置。
4.2.2.2利用原有的标准曲线接着进行样品浓度测定时
4.2.2.2.1  调出所测定样品的浓度方法文件，首先调出refs页，将原设edit  mode选项取消，改设左上角的using  exiting
calibration。重新将方法存盘，则今后再调用时即不需再作修改。
4.2.2.2.2  在sample页中按要求重设各种样品名称机样品信息。
4.2.2.2.3  按工具条中setup键，将主机设到该方法所设定的条件。
4.2.2.2.4  将参比溶液放入比色室，按autozero键做背景校零。
4.2.2.2.5  按start键，按设定的样品顺序放入各样品管，每次按提示进行操作。
4.2.2.2.6  屏幕上出现结果窗口，结果数据将依次显示在样品表中相应位置。

分光光度计的使用方法
　　1）预热仪器。为使测定稳定，将电源开关打开，使仪器预热20min，为了防止光电管疲劳，不要连续光照。预热仪器时和在不测定时应将比色皿暗箱盖打开，使光路切断。
　　2）选定波长。根据实验要求，转动波长调节器，使指针指示所需要的单色光波长。
　　3）固定灵敏度档。根据有色溶液对光的吸收情况，为使吸光度读数为0.2-0.7，选择合适的灵敏度。为此，旋动灵敏度档，使其固定于某一档，在实验过程中不再变动。一般测量固定在“1”档。
　　4）调节“0”点。轻轻旋动调“0”电位器，使读数表头指针恰好位于透光度为“0”处（此时，比色皿暗箱盖是打开的，光路被切断，光电管不受光照）。
　　5）调节T=100％。将盛蒸馏水（或空白溶液或纯溶剂）的比色皿放入比色皿座架中的第一格内，有色溶液放在其它格内，把比色皿暗箱盖子轻轻盖上，转动光量调节器，使透光度T=100％，即表头指针恰好指在T=100％处。
　　6）测定。轻轻拉动比色皿座架拉杆，使有色溶液进入光路，此时表头指针所示为该有色溶液的吸光度A。读数后，打开比色皿暗箱盖。
　　7）关机。实验完毕，切断电源，将比色皿取出洗净，并将比色皿座架及暗箱用软纸擦净。

紫外光分光光度计使用，使用前仪器要调零、调百校准,参比溶液又称空白溶液.测量时用作比较的、不含被测物质但其基体尽可能与试样溶液相似的溶液.通常,用参比溶液扫描的曲线应是一条平坦的直线.有时,基体中虽不含被测物质,但含有别的物质,这时必须保证其不影响测试.经常碰到的是试剂空白中含有被测物质,此时必须经过纯化将其除去.否则将影响测定结果.在色谱分析中,有时基体中可能存在一个以上的和被测组分相距较远的色谱峰,计算机在数据处理中不会计入它们,不影响测定.